Меню

Внутрикожная аллергическая проба при диагностики туберкулеза

6. Аллергическая диагностика туберкулёза

Существует несколько методов аллергической диагностики: внутрикожный, глазной метод и метод симультанной аллергической диагностики.

ППД — туберкулины обладают специфическим действием и применяются для выявления животных, больных туберкулезом.

Туберкулин очищенный (ППД) для млекопитающих — purified tuberculin (РРd) for mammals — ППД — туберкулин для млекопитающих выпускается в сухом виде или в виде стандартного раствора

Сухой туберкулин представляет собой пористую массу светло-коричневого

цвета с серым оттенком.

Стандартный раствор ППД — туберкулина представляет собой прозрачную

жидкость светло-коричневого цвета без каких-либо примесей.

Вместе с сухими ППД — туберкулинами выпускается растворитель микобактериальных аллергенов, который представляет собой бесцветную прозрачную жидкость без каких-либо примесей.

Сухие ППД — туберкулины должны полностью растворяться в растворителе в

течение 1 — 2 мин.

ППД — туберкулины и растворитель расфасованы в пенициллиновые флаконы, укупорены резиновыми пробками, закатаны металлическими колпачками.

На флаконе должно быть указано сокращенное наименование препарата: с сухим туберкулином для млекопитающих — «ППД — туберкулин для млекопитающих», с жидким туберкулином для млекопитающих — «ППД — туберкулин для млекопитающих, стандартный раствор и номер серии.

Во флаконе ППД — туберкулина для млекопитающих вместимостью 20 мл содержится 1 000 000 МЕ (международных единиц) препарата.

Допускается другая фасовка, согласованная в установленном порядке.

При растворении в прилагаемом растворителе должно быть обеспечено содержание ППД — туберкулина для млекопитающих 50 000 МЕ в 1 мл раствора.

Флаконы с ППД — туберкулинами должны быть упакованы в коробки с разделительными перегородками. В коробку с сухим ППД — туберкулином должно быть установлено равное количество флаконов с растворителем микобактериальных аллергенов или к каждой коробке с сухим ЛИД — туберкулином прилагают коробку с таким же количеством флаконов с растворителем.

В каждую коробку вкладывают наставление по применению туберкулинов.

На коробке с ППД — туберкулином для млекопитающих должно быть указано: наименование предприятия — изготовителя и его товарный знак, полное наименование препарата, количество флаконов с туберкулином и растворителем, количество доз препарата во флаконе, количество МЕ во флаконе, количество растворителя во флаконе, номера серий туберкулина и растворителя, номера контроля туберкулина и растворителя, обозначения стандартов (ГОСТ, ТУ), дата изготовления, условия хранения, срок годности.

Туберкулины должны храниться в упаковке изготовителя в закрытых сухих помещениях при температуре 2 — 8ºС.

Срок годности туберкулина — 3 года со дня изготовления.

ППД — туберкулины для млекопитающих представляют собой очищенную белковую фракцию, выделенную из культуральный жидкости возбудителя туберкулеза соответственно бычьего вида, выращенного на синтетической питательной среде.

ППД — туберкулин при введении животным, больным туберкулезом, в зависимости от способа применения вызывает местную или общую аллергическую реакцию.

Местная реакция на внутрикожное введение туберкулина может проявляться также у животных, инфицированных атипичными микобактериями разных видов, не вызывающими патологических изменений в органах и тканях.

При тяжелых формах туберкулеза, нарушениях обмена веществ, иммунодефицитах и т.п. больные животные могут не реагировать на введение туберкулина.

ППД- туберкулины не обладают реактогенными свойствами и безвредны.

Активность ППД — туберкулинов для млекопитающих равна(50 000 ± 10 000) МЕ в 1 мл раствора.

Порядок применения туберкулинов.

ППД — туберкулины применяют для аллергической диагностики туберкулеза у млекопитающих.

Аллергическое исследование проводят в соответствии с действующим наставлением по диагностике туберкулеза животных в порядке и сроки, предусмотренные Санитарными правилами СП 3.1.093 — 96 и Ветеринарными правилами ВП

13.3.1325-96, п.10. «Туберкулез», утвержденными Госкомсанэпиднадзором и

Минсельхозпродом России в 1996 г.

Туберкулинизацию животных разрешается проводить только ветеринарным врачам и ветеринарным фельдшерам со специальным средним образованием под контролем врача.

Каждый флакон с туберкулином и растворителем перед применением просматривают. При обнаружении в препаратах, каких — либо примесей, при нарушении целостности стекла или укупорки, отсутствии надписей на флаконах их выбраковывают.

Для внутрикожного и пальпебрального введения туберкулина используют шприцы с бегунком вместимостью 1 — 2 мл и иглы для внутрикожных инъекций № 0606 ТУ 46-22-607 или безыгольные инъекторы БИ-7, ИБВ — 02.

Для нанесения туберкулина на конъюнктиву применяют глазные пипетки, для внутривенного введения — шприцы вместимостью 5 — 10 мл и иглы для подкожных инъекций.

Туберкулин используют только в день вскрытия флакона, остатки препарата сливают в канализацию.

Инструменты, используемые для туберкулинизации, не разрешается применять для введения животным других веществ.

Шприцы, иглы и глазные пипетки до и после их использования стерилизуют кипячением в течение 10 мин в дистиллированной или кипяченой воде без добавления дезинфицирующих веществ. Безыгольные инъекторы стерилизуют в соответствии с наставлением по их применению.

Во время проведения внутрикожной и пальпебральной туберкулинизации животных инъекционные иглы сменяют на стерильные перед каждым наполнением шприца туберкулином, а в паузах между инъекциями препарата иглу держат в ватном тампоне, смоченном 70%-ным этиловым спиртом, не снимая ее со шприца.

При внутривенном введении туберкулина для каждого животного используют отдельную стерильную иглу.

Читайте также:  При аллергии переливают кровь

Для исследования на туберкулез применяют:

— у млекопитающих животных (кроме свиней) — очищенный (ППД) туберкулин для млекопитающих;

— у свиней — одновременно очищенный (ППД) туберкулин для млекопитающих и сухой очищенный (ППД) туберкулин для птиц.

Сухие туберкулины непосредственно перед применением растворяют. Для этого содержимое одного флакона с туберкулином растворяют в одном флаконе прилагаемого к нему растворителя.

При исследовании свиней содержимое двух флаконов туберкулина для птиц растворяют в одном флаконе растворителя.

Для исследования обезьян раствор туберкулина разводят в 10 раз (1 мл туберкулина в 9 мл растворителя) стерильным физиологическим раствором рН=7,0 (+- 0,5) или растворителем микобактериальных аллергенов.

Внутрикожная и пальпебральная туберкулиновая проба.

Туберкулинизации подвергают животных, начиная с двухмесячного возраста. Коров (нетелей), буйволиц, верблюдиц исследуют независимо от периода беременности. Самок других видов животных исследуют через 1 — 2 недели после родов.

Не разрешается исследовать животных в течение трех недель после вакцинации против инфекционных болезней.

Перед введением туберкулина волосяной покров у животных (кроме овец, коз и норок) выстригают, перья выщипывают, кожу обрабатывают 70% этиловым спиртом.

Вводить туберкулин в кожу, имеющую травматические повреждения, уплотнения и абсцессы, поражения грибками, клещами или гельминтами запрещается.

Туберкулин вводят внутрикожно в дозе 0,2 мл:

— крупному рогатому скоту, буйволам, зебувидным, оленям (маралам), кроме

быков — в середине шеи (в этой области не разрешается вводить животным какие -либо другие биологические препараты и вещества);

— быкам — в подхвостовую складку;

— верблюдам — в кожу брюшной стенки в области паха на уровне горизонталь-

ной линии седалищного бугра;

— свиньям — в области наружной поверхности уха в 2 — 3 см от его основания,

при этом в кожу одного уха вводят туберкулин для млекопитающих, а в кожу

другого уха — туберкулин для птиц.

Свиньям в возрасте 2 — 3 мес. туберкулин лучше вводить безыгольным инъектором в кожу поясничной области слева и справа в 5-8 см от позвоночника.

Собакам, пушным зверям (кроме норок) туберкулин вводят в области внутренней поверхности бедра или локтевой складки.

Туберкулин вводят внутрикожно в дозе 0,1 мл:

— кошкам — на внутренней поверхности уха,

— обезьянам — в области грудной стенки на 5-6 см выше сосков.

Туберкулин вводят пальпебрально (в толщу века):

— козам и овцам в дозе 0,2 мл в нижнее веко, отступя от его края на 1,5-2 см,

— норкам в дозе 0,1 мл — в верхнее веко.

Учет и оценку реакции проводят у крупного рогатого скота, буйволов, зебувидных, верблюдов и оленей через 72 часа после введения препарата, у коз, овец, свиней, собак, кошек, обезьян, пушных зверей — через 48 часов.

При учете реакции на введение туберкулина у каждого обследуемого животного прощупывают место введения препарата. При пальпебральном введении туберкулина визуально также сравнивают веки левого и правого глаза.

При обнаружении припухлости в месте введения туберкулина у крупного рогатого скота, буйволов, зебувидных, верблюдов, оленей измеряют кутиметром толщину кожной складки в миллиметрах и определяют величину ее утолщения сравниванием с толщиной складки неизмененной кожи в близи от места введения туберкулина.

Животных считают реагирующими на туберкулин:

— крупный рогатый скот (кроме быков), буйволов, зебувидных, верблюдов, оленей — при утолщении кожной складки на 3 мм и более независимо от характера припухлости (отечности, болезненности, повышения местной температуры);

— быков (волов), коз, овец, свиней, собак, кошек, обезьян, пушных зверей — при образовании ощутимой припухлости в месте введения туберкулина.

В хозяйствах, неблагополучных по туберкулезу крупного рогатого скота, для более полного выявления больных животных применяют двукратную туберкулиновую пробу. С этой целью животным, не реагировавшим на первую инъекцию туберкулина, препарат вводят повторно сразу после учета реакции в то же место в той же дозе. Реакцию на повторное введение учитывают через 24 часа и оценивают, как указано выше.

В неблагополучных по туберкулезу хозяйствах животных, реагирующих на внутрикожную туберкулиновую пробу, считают больными туберкулезом независимо от наличия или отсутствия у них на вскрытии туберкулезных изменений. В таких хозяйствах всех животных, реагирующих на туберкулин, сразу после учета реакции таврят буквой «Т» с помощью раскаленного тавра.

В благополучных хозяйствах животных, реагирующих на туберкулин, считают подозреваемыми в заражении возбудителем туберкулеза и проводят комплекс дополнительных исследований для подтверждения или исключения диагноза.

Глазная туберкулиновая проба (офтальмопроба).

Глазную туберкулиновую пробу применяют для диагностики туберкулеза у лошадей.

У крупного рогатого скота эту пробу можно применять только одновременно

с внутрикожной пробой в неблагополучных по туберкулезу хозяйствах для дополнительного выявления зараженных животных.

Офтальмопробу можно использовать также одновременно с внутрикожной пробой при выборе животных для диагностического убоя. Наиболее часто диагноз на вскрытии подтверждается у животных, реагирующих одновременно на внутрикожную пробу и офтальмопробу.

При каких — либо поражениях глаз исследование животных офтальмопробой запрещается.

Читайте также:  Аллергия у кота глаза слезятся глаза

Глазную туберкулиновую пробу проводят двукратно с интервалом 5-6 сут. между первым и вторым введением препарата. Туберкулин в количестве 3 -5 капель наносят пипеткой или шприцем с бегунком без иглы на конъюнктиву при оттянутом нижнем веке.

Животных в период повторного введения туберкулина и учета реакции содержат на привязи.

Учет и оценку реакции проводят через 3, 6, 9, и 12 часов после повторного введения туберкулина. Реакция характеризуется гиперемией и возможным отеком конъюнктивы, накапливанием в конъюнктивальном мешке гнойного или слизисто-гнойного секрета и вытеканием его из внутреннего угла глаза в виде шнура.

При каждом учете реакции у всех обследуемых животных необходимо осматривать конъюнктивальный мешок, т.к. реакция может ограничиться кратковременным образованием гнойного секрета в виде зернышек.

Внутривенная туберкулиновая проба.

Внутривенную туберкулиновую пробу применяют с целью отбора животных для диагностического убоя. У больных туберкулезом животных реакция на внутривенное введение туберкулина характеризуется в большинстве случаев повышением температуры тела. Возможна общая реакция организма в виде судорожных явлений, сильного беспокойства, редко — потеря сознания и гибель от анафилактического шока.

Туберкулин вводят после проведения внутрикожной пробы только взрослым животным, за исключением коров в течение месяца до отела и месяца после отела.

Перед введением туберкулина у животных измеряют температуру тела. Животных с температурой тела 39,6ºС и выше внутривенной туберкулиновой пробой не исследуют.

Непосредственно перед применением раствор туберкулина разводят в два раза (один флакон раствора туберкулина разводят таким же количеством растворителя микобактериальных аллергенов или стерильного физиологического раствора) и получают 50%-ный раствор препарата.

Исследуемому животному вводят в яремную вену 1 мл 50%-ного раствора туберкулина на 100 кг массы тела (обычно 4 мл).

Учет и оценку реакции проводят через 3,6 и 9 час. после инъекции препарата путем измерения температуры тела животного.

Реагирующими на внутривенную пробу считают животных с повышением температуры тела хотя бы при одном измерении на один и более градусов выше 39ºС.

Применение туберкулинов не требует ограничений в сроках убоя животных на мясо, использования молока и другой продукции.

Меры личной профилактики.

Туберкулины безвредны для людей, не больных туберкулезом, при работе с ними не требуют применения мер безопасности.

Лицам, больным туберкулезом, работать с туберкулинами не разрешается.

Источник



МЕТОДЫ РАННЕГО ВЫЯВЛЕНИЯ ТУБЕРКУЛЕЗА

Туберкулинодиагностика — внутрикожная проба Манту с 2 ТЕ

Туберкулиновая проба Манту, в просторечье “пуговка” — это специфический диагностический тест (не путать с прививкой!), применяемый при массовом обследовании населения на туберкулез.

Для проведения туберкулиновых проб используют туберкулин, который по своему составу является сложным соединением. Он не содержит живых или убитых микобактерий туберкулеза, а только продукты их жизнедеятельности, элементы микробной клетки и часть среды, на которой росли микобактерии туберкулеза.

На введение туберкулина возникает ответная аллергическая реакция (положительная туберкулиновая проба) у привитых вакциной БЦЖ против туберкулеза (поствакцинальная аллергия) и у инфицированных микобактериями туберкулеза (инфекционная аллергия). В обоих случаях в организме обследуемого находятся туберкулезные палочки. Только в первом случае они внесены с вакциной BCG и поддерживают иммунитет к туберкулезу, а в другом попали в организм из окружающей среды и являются вирулентными, т.е. в определенных условиях могут вызвать заболевание.

Учитывая такую низкую специфичность (то есть проба положительная и у здоровых, и у больных людей), сама по себе положительная реакция Манту не является 100% доказательством инфицирования туберкулезом.

Чаще всего врачу приходится решать, что стоит за положительной реакцией — вакцинация или инфицирование. В случае неверной интерпретации он может либо необоснованно назначить профилактическую противотуберкулезную терапию, либо недооценить положительную реакцию, принять ее за проявления поствакцинальной аллергии – и опоздать с выявлением и лечением имеющегося туберкулеза.

В настоящее время разработаны более эффективные тесты, которые могут определять наличие в организме именно микобактерий туберкулеза, способных вызвать болезнь.

Внутрикожный диагностический тест с аллергеном туберкулезным ре­комбинантным – ДИАСКИНТЕСТ®

Диаскинтест® (Аллерген туберкулезный рекомбинантный в стандартном разведении) — инновационный внутрикожный иммунологический диагностический тест, который представляет собой рекомбинантный белок, содержащий два связанных между собой антигена — ESAT6 и CFP10, характерных для патогенных штаммов микобактерий туберкулеза (Mycobacterium tuberculosis) 1 . Данные антигены отсутствуют в вакцинном штамме Mycobacterium bovis BCG и у большинства нетуберкулезных микобактерий, поэтому Диаскинтест® вызывает иммунную реакцию только на микобактерии туберкулеза и не дает ложной реакции, связанной с вакцинацией БЦЖ.

То есть Диаскинтест выявляет состояния, когда человек действительно нуждается в более тщательном дообследовании и проведении профилактической терапии для предупреждения развития заболевания, не зависимо от результатов вакцинации БЦЖ.

Диаскинтест® обладает практически 100% чувствительностью и специфичностью 2 , сводя к минимуму вероятность развития ложноположительных реакций 3 , и позволяет диагностировать и латентную (скрытую) инфекцию, и активный туберкулезный процесс, в том числе на ранних этапах развития.

Техника постановки Диаскинтеста и учета результатов идентичны пробе Манту с туберкулином 4 . Постановка теста не требует наличия специально оснащенной лаборатории и исключает необходимость внутривенных манипуляций, что очень важно при обследовании детей, особенно младшего возраста!

Читайте также:  Гомеопатия при аллергической сыпи

С 2017 года применение Диаскинтеста в скрининге туберкулеза у детей старше 7 лет и подростков регламентировано Приказом Минздрава России №124н от 21 марта 2017 года 5 .

Диагностические лабораторные тесты: T-SPOT.TB

T-SPOT.TB является in vitro иммунологическим диагностическим тестом, направленным на определение специфического гамма-интерферона в крови пациента, который вырабатывается, если в организме человека есть антигены ESAT-6 и CFP-10, которые характеры только для Mycobacterium tuberculosis. В тесте определяется число Т-клеток, отвечающих на стимуляцию антигенами ESAT-6 и CFP-10. Эти антигены не выявляются во всех штаммах БЦЖ и у представителей семейства нетуберкулезных микобактерий. Чувствительность и специфичность Т-SPOT.TB, так же как и Диаскинтеста, по данным исследователей превышает 90,0% 6 .

Лабораторный тест позволяет диагностировать и латентную (скрытую) инфекцию, и активный туберкулезный процесс.

Источник

Внутрикожная аллергическая проба при диагностики туберкулеза

При ряде инфекционных заболеваний организм приобретает повышенную чувствительность к аллергенам бактерий их вызывающих. Этот феномен помогает установлению этиологического диагноза. В ряде случаев специфическая бактериальная аллергия формируется рано, в первые дни болезни, что используют в целях ранней диагностики туляремии (внутрикожная аллергическая проба с тулярином становится положительной на 2-й — 3-й день).

В других случаях аллергическая перестройка организма происходит позднее и выявление специфической аллергии может быть использовано в интересах ретроспективного диагноза. Методы гипосенсибилизации организма с помощью соответствующих аллергенов используют для лечения больных некоторыми хроническими формами болезней. Лечебное применение бактериальных аллергенов оправдано в случаях, когда антибактериальная терапия и другие методы лечения не достигают успеха и болезнь приобретает хроническое рецидивирующее течение.

К таким нозологиям в настоящее время можно отнести ряд инфекционных болезней, дающих хронические формы нелегочный туберкулез (поражение сетчатки глаза), бруцеллез (рецидивирующий миокардит), токсоплазмоз (поражения опорно-двигательного аппарата).

Аллергические пробы (накожные и внутрикожные) получили всеобщее признание в диагностике таких бактериальных инфекций, как туляремия, бруцеллез (проба Бюрне), туберкулез (накожная проба Пиркета и внутрикожная проба Манту) токсоплазмоз, грибковые поражения кожи, сап и риккетсиозы (лихорадка Ку). Наиболее проста для выполнения накожная аллергическая проба в сравнении с внутрикожной и другими способами введения аллергена.

Методика внутрикожной аллергической пробы состоит в следующем: на сгибательную поверхность предплечья или на кожу плеча (после обработки 70% спиртом) наносится капля аллергена и через нее производят легкую скарификацию (без появления крови!). Положительная проба (через 24 и 48 ч) при наличии сенсибилизации организма к вводимому аллергену проявляется воспалительной реакцией различной интенсивности: краснота, отек, образование пузырьков, иногда с ощущением местного зуда и жжения.

Степень выраженности реакции и ее продолжительность зависят от состояния сенсибилизации организма и концентрации бактериального аллергена (например при диагностике туберкулеза она не должна быть выше 1:10 000 (!) во избежание очаговых реакций в легких, протекающих с деструкцией (!) легочной ткани).

Диагностика вирусных инфекций

В основе лабораторной диагностики вирусных инфекций лежит обнаружение вируса и антител к нему. Материалом для исследования служат биологические жидкости организма и ткани, где вирус содержится в наибольших количествах. В зависимости от характера и стадии болезни исследуют кровь, спинномозговую жидкость, отделяемое конъюнктивы, уретры, шейки матки, носоглоточную слизь, фекалии, мочу и кусочки тканей органов, полученные с помощью прижизненной биопсии или у трупа.

Для вирусологических исследований материал от больного вводят различным лабораторным животным, в куриные эмбрионы и тканевые культуры; выбор материала и метод исследования определяется тропизмом вируса, присущим различным вирусным инфекциям и его способностью к размножению in vivo и in vitro. Идентификация вируса проводится с помощью специфических методов с применением серологических реакций.

В последние годы для диагностики применяют полимеразно-цепную реакцию (ПЦР), спектр индикации различных вирусов этим методом быстро расширяется. В настоящее время разработана вирусологическая диагностика гепатитов А, В, С, Д, G, TTV; определение вирусов герпеса, цитомегаловирусов, ВИЧ и др. Определяют не только их присутствие в исследуемом материале (кровь и др.), но и количество вирусных частиц (так называемую «вирусную нагрузку» -степень вирусемии и репликацию вируса), что важно не только для диагностики, но и для динамического наблюдения за течением болезни и для оценки эффективности проводимого противовирусного лечения (количество вируса снижается вплоть до его исчезновения).

Наряду с ПЦР сохраняют свое значение некоторые рутинные лабораторные методы диагностики вирусных инфекций: прямая микроскопия мазков-отпечатков из носа для определения ДНК- и РНК-содержащих вирусов; реакция иммунофлюоресценции (РИФ), непрямой иммунофлюоресценции (РНИФ) в диагностике гриппа и других ОРВИ; выделение чистых культур вирусов гриппа для определения их типа.

Широко применяют РСК для определения титра антител у больных в динамике болезни; реакцию торможения гемагглютинации (РТГА), позволяющую определить степень специфического иммунологического ответа организма; применяют также реакции нейтрализации, преципитации в агаре и многие другие специальные вирусологические методы.

Источник